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根據抗體類型與用途選擇不同的提純方法
點擊次數:394 發布時間:2017-04-20

    總所周知不同方法制備的抗體往往與多種雜蛋白混雜在一起,為了獲得成分相對單一的抗體或將抗體用于特定的用途,就需要進行抗體純化。抗體純化分了幾種類型,根據用途決定選擇哪種方法進行純化:
1. 粗純:將制備抗體的血清或是腹水,細胞上清,直接用鹽析法進行處理,這樣可以將這些物質里面的其他雜質去掉,獲得蛋白的成分,但是由于是粗純,里面會混有大量的其他蛋白,這樣獲得的抗體,純度較低,用于實驗中背景比較高。
2.通用型純化:用抗體結合蛋白Protein A,Protein G或者Protein L。因為不同來源的抗體和這些抗體結合蛋白的結合能力不同,所以需要根據抗體來源選擇使用哪種抗體將誒和蛋白。對于有一些單鏈抗體,則多半使用protein L來進行純化。經過抗體結合蛋白的親和純化后,溶液中基本只保留了抗體的成分,其他蛋白都去掉了,抗體純度可以比較高。相對來說,這種方法是大規模抗體制備中,用得zui多的純化方法,很多抗體公司都采用這種方法來對抗體進行純化。
3.特異型純化:但是有些抗體,需要純度特別高,特異性特別好,就不能簡單采用上述兩種方法進行純化了。必須要通過將抗原固定制備成特異的親和純化柱,再純化抗體。這個時候得到的就全是針對一種抗原的抗體了,特異性。當然,由于牽涉到抗原固定等操作,成本是
相應的。

         

 

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