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上海恒遠生物對檢測樣本處理方法的介紹
點擊次數:461 發布時間:2018-03-15

  一個人不能沒有生活,而生活的內容,也不能使它沒有意義。做一件事,說一句話,無論事情的大小,說話的多少,您都得自己先有了計劃。上海恒遠生物公司曾多次強調過,在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定,并且注意避免反復凍融。在ELISA試劑盒檢測實驗前,樣本的處理與保存時影響整個實驗的重點因素之一。今天小編為科研朋友介紹ELISA試劑盒實驗檢測樣本處理方法的介紹。

一、血清
    對于血清樣本的處理,都是離心取上清液待檢,在做預實驗過程中,血清樣本稀釋5倍直接進行
實驗。室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

 

二、血漿
    應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右
(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

 

三、尿液
    用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成
,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。


四、糞便樣本的處理方法
    對于糞便樣本的處理,一般要求采集干的糞便,稀的糞便不利于檢測(對樣本處理帶來難度,也
會使準確性降低)。

    糞便樣本處理如下:
    ① 收集:直接用醫院臨床收集糞便的耗材進行收集;

    ② 采樣:一般選取的重量不能低于50mg,以1g為基準。稱取1g加9ml的PBS(磷酸鹽緩沖液,PH控制在7.2-7.4,濃度為0.01mol/L)換算成勻漿的比例就是10%;

    ③ 保存:勻漿后的樣本如果采樣周期在1周之內,可以保存在2-8℃,如果取樣周期在一個禮拜以上一個月以內,-20℃保存。如果取樣周期超過1個月,保存在-80冰箱!低溫保存的話,盡量避免反復凍融。


五、組織標本
    切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍
然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑,用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

    植物組織的提取,不管是根莖組織還是葉片組織還是果實組織,都應該采用鮮重的計重方式,一般要遵循以下原則:

    ① 稱取的組織重量不能低于50mg。
    ② 勻漿的比例按照10%,即1g組織加9ml的勻漿液,勻漿液一般選取PBS(PH=7.2-7.4)
    ③ 組織在勻漿器勻漿過程中,勻漿液應該分2次加進去,這樣勻漿更充分。
    ④ 充分勻漿完成后離心取上清,離心機的轉數選取2000-3000轉每分,轉數不宜超過5000.離心
時間為15-30分鐘。

 

六、細胞培養上清
    檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。

 

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